水中叶绿素a测定的意义（水中叶绿素a的测定方法）

叶绿素（Chlorophyll）是植物光合作用中的重要光合色素，可分为a、b、c、d四类。其中叶绿素a本身对环境没有危害，但它是估算浮游植物生物量的重要指标，可以通过测定水中浮游植物叶绿素a的含量，掌握水体的初级生产力情况和富营养化水平，在环境监测中，叶绿素a含量是评价水体富营养化的指标之一。

在地表水中藻类叶绿素含量测量的标准实施规程中，水中叶绿素a测定标准方法采用90%丙酮为提取试剂，玻璃纤维滤膜过滤水样，研磨后4℃浸泡提取浮游植物的叶绿素。测定叶绿素a的主要步骤如下：

（1）过滤

抽滤前加入碳酸镁悬浊液防止色素分解。负压不能超过50kPa。

（2）叶绿素的提取

先研磨，将滤膜放置于组织研磨器中，加入4-5ml 的90%丙酮溶液，500r/min 研磨3min。破碎滤膜上浮游植物藻类细胞。

然后浸泡提取：将破碎后的细胞提取液转移至15ml 离心管中，用90%丙酮溶液冲洗研磨器及研磨杵一并转入离心管，定容至10ml。混匀后4℃暗处浸泡提取。浸泡时间为15min 至24h。过程中要颠倒混匀数次。

最后离心澄清：1000g 离心20min 或过滤，将上清液转移至旋塞玻璃小瓶中。

（3）测定方法

分光光度法，三色方程测定664nm、647nm、630nm、750nm 吸光度计算叶绿素a、b、c 叶绿素含量。单色方程测定脱镁叶绿素a校正后的含量。